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1、首先,根据需要对齐长、短玻璃板的一侧,插入约1.5cm宽的间隔物,用1%琼脂糖密封板的侧面和底部。
2、然后根据待分离DNA的大小,配制适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶,将装载的玻璃电泳板倾斜45-60度,将配制好的凝胶慢慢倒入两块玻璃板之间的凝胶床中。
3、然后,停止加胶,直到离短玻璃板的上边缘约0.5厘米。同时轻轻插入大小合适的梳子,小心取出梳子,立即用缓冲液冲洗加样孔,用吸水纸吸干加样孔中的缓冲液。
4、然后将凝胶固定在电泳槽上,加入1XTBE缓冲液,将DNA样品与适量的上样缓冲液混合,加入样品孔中。
5、然后,连接电极,将电压设置为1-8V/cm,并进行电泳。电泳结束后,切断电源,丢弃电泳仪,取出凝胶底板,小心取下玻璃板。
6、最后让凝胶吸附在另一块玻璃板上,浸入含0.5 g溴化乙锭的溶液中,取出15-30min,用水冲洗,用紫外仪观察结果,用凝胶成像系统拍照。
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